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人乳腺癌细胞-荧光素酶标记

简要描述:MDA-MB-231-luc人乳腺癌细胞-荧光素酶标记
|细胞系|细胞株|肿瘤细胞|细胞|贴壁细胞|悬浮细胞|,细胞库管理规范,提供的细胞株背景清楚,提供参考文献和*培养条件

  • 产品型号:MDA-MB-231-luc
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-11-18
  • 访  问  量:2316

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MDA-MB-231-luc人乳腺癌细胞-荧光素酶标记

二、细胞收到后处理


细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满*培养液并封好瓶口是细胞运输的好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的*培养液收集至离心管中,加入6ml*培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,处理完后放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的*培养基,另外一瓶用自己配的*培养基)


三、细胞培养步骤


  1. 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL*培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

  2. 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的*培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,*脱落后吸出,在1000RP不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.M条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。


























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