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关于ATCC的细胞 ,你需要知道的那些事儿

浏览次数:521发布日期:2020-01-08
   关于ATCC的细胞 ,你需要知道的那些事儿
  ATCC以生命科学领域全方位知识的获取,分类,汇总,完善进而广泛传播为己任,以期为推动生物原料,生物信息,生物技术,知识产权,规范等相关领域的前沿性、合法化、实用性发挥一定的作用。
  ATCC拥有目前zui大的、品种zui丰富的微生物、细胞系以及重组DNA原料,同时它也是科研工作者公认的提供可靠的研究材料的供应商。
  ATCC的成立可追溯到1925年,一个科学委员会认识到科学研究对于微生物的大量需求而萌发了创建一个微生物相关制品供应中心的想法。
  而今,ATCC已经发展成了一个性的非营利性的生物资源中心,向遍布的企业、政府以及科研机构提供生物制品、技术支持和培训教程。
  细胞模型是促进我们对细胞生物学、分子信号通路的认识、以及发现新的治疗方法的一个重要工具。对基因异常引起疾病的病因学研究,以及对潜在治疗方法的评估,通常都是通过相关的体外模型来完成的。
  复苏程序:
  1、准备细胞培养容器(如T-75细胞瓶),加入至少10 ml适当的培养基,并平衡温度及pH。
  2、从液氮罐中取出冻存管,并在37℃(或适合该细胞的温度)水浴中缓慢摇动至冰晶彻底融化(约2 min),注意解冻过程要迅速。
  3、从水浴中取出冻存管,浸泡或者喷撒酒精消毒。后续的操作,需在无菌操作台中,并保证严格无菌。
  4、拧开冻存管盖,将细胞悬液转移至含有9ml完全培养基的无菌离心管中。温和离心(125g×10min),弃去上清去除冻存保护剂。注意不要扰动细胞层。加入1-2 ml完全培养基重悬细胞,缓慢吹打使细胞团变松散。将细胞悬液转移至含培养基的容器中充分混合。
  5、24小时后,检测细胞状态。
  注:细胞复苏时,应以zui快速度融化冻存的细胞溶液,然后迅速与完全培养基混合,并接种到合适的细胞瓶中。
  单层贴壁细胞:
  为了保证单层贴壁细胞的对数生长,需要定期传代。当细胞生长接近指数生长后期(汇合率大约70%到90%),准备传代。针对传代过程,ATCC提供的产品说明中,会推荐细胞传代分配比例和补充培养基策略。
  单层贴壁细胞传代,需要打断细胞之间的连接。对于比较松散的连接,猛击培养瓶侧壁,可以分离细胞。很多情况下,需要胰蛋白酶/EDTA的蛋白水解酶来消化。对于一些细胞系,需要采用刮等机械方法分离细胞。细胞分离成为单细胞悬液后,稀释到适当的密度并转移到新的培养瓶中,在适当的生长培养基中,细胞将再贴壁生长和分裂。
  由于每种细胞都是独一无二的,孵化时间和温度、清洗次数或溶液配方可能会有所不同。分离过程中,应用显微镜密切观察细胞,以防止细胞损伤。这个过程根据容器使用合适的培养体积。
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