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你知道你培养的细胞还是不是原来的细胞?

发布时间:2019-12-25      点击次数:555
   你知道你培养的细胞还是不是原来的细胞?
  要说一个实验汪怕什么,细胞养死了是*
  但是,还有一种情况更绝望,那就是——细胞还好好的,但是这个细胞它已经不是它!
  所以,你新买到的细胞、实验室传了几代的细胞、又或者储存于超低温冰箱几年不用的细胞,它真的还是原来的那个细胞吗?
  其实细胞系认证的问题已经存在了几十年,2017年,有机构研究抽查了中国28个研究机构中保存的278个细胞系,并对细胞进行鉴定。
  调查结果显示,有128个细胞系是错误鉴定的,错误率高达46%。
  因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞**灾难性后果……这浪费大量时间、精力和金钱。
  细胞系被错误识别,往小了说会浪费时间和金钱,导致结果不可重复性,文献被退回;
  往大了讲还可能对人类健康产生潜在的威胁,、疫苗和其它生物都是以实验室的研究发现为基础而产生的,往往都是跟细胞培养相关。
  细胞是一种很特殊的商品,由于其具有可复制性,因此很容易被自行复制后进行出售传播,而这些自行传代复制的细胞几乎没有成本,所以很容易引起大家购买。
  但是这些细胞传代的次数、培养的条件以及是否有污染等都无法得到保障,等你实验焦头烂额毫无进展却突然发现是细胞被污染了,那滋味真的是不好受的!
  有没有想过细胞STR鉴定?!
  细胞STR鉴定是什么?——给你的细胞一个“明明白白的”身份!
  STR,全称Shorttandemrepeat,中文名“短串联重复序列”,是一类广泛存在于真核生物基因组中的DNA串联重复序列,其核心序列2~7bp,重复次数通常为10~30次。由于核心序列重复次数的个体间差异,多数STR基因具有多态性。
  不同个体来源的细胞在不同STR位点具有特异性的重复次数,因而使得不同细胞具有其特征性的图谱,根据图谱的数据可以判定细胞是否为单一细胞。
  近年来由于其检测手段和技术方法的改进已经广泛应用于遗传制图、基因定位、法医学鉴定、人类学以及遗传病的诊断等许多领域的研究,是目前应用比较广泛的遗传标记。
  细胞STR鉴定的特点
  STR图谱鉴别通过标准化的操作,采用自动化的DNA分析仪对PCR产物进行**的分析,并以简单的数字描述STR序列重复次数,不仅增加了结果的客观性,而且所需细胞数量少(低至1×103个细胞,
  而细胞检定中常规采用的同工酶法通常需要5×106个细胞),结果稳定,特异性强。总的来说,其分型快速、经济、易于自动化,可重复性好,且数据格式适合建立一个标准参考数据库的特点,使得STR的应用价值*大。
  细胞STR鉴定的案例
  已被描述的经典案例是Hela细胞污染(关于Hela细胞污染有好几个案例),令人惊奇的是,许多被Hela细胞污染的细胞系居然在一些备受尊敬的杂志上仍被使用,而这一使用距离它们*先发现为Hela细胞的时间长达40年之久。
  T24是另外一种生长快速的细胞系,它常常污染许多经推测来源于不同膀胱癌的细胞系。EVC304*先被认为是自发转化的人类正常内皮细胞系,但后来却发现它是T24膀胱癌细胞系。令人感到意外的是,EVC304不是内皮细胞的这一论述对它作为内皮细胞模型的公开发表几乎没多大影响。
  细胞STR鉴别刻不容缓
  有许多缘由可以引起细胞培养物错误鉴定,每一个实验室都存在风险。
  造成这种问题出现的原因有:实验员的工作负荷,缺乏注意,在细胞操作过程中的分心,试剂的共用,耗材共用,在没有充分分离每一细胞类型情况下同时对多个培养物进行操作等。
  当交叉污染发生时,一种细胞类型迅速生长而超过另一种,在4-5次细胞传代后,一个纯的污染细胞培养物将会形成。
  异种移植也会导致细胞系交叉污染和错误鉴定,来自异种移植的复苏细胞会被宿主动物细胞所替代。因此,由于这些缺乏重视及未采取质控措施导致的细胞错误鉴定现象开始普遍。
  但简单、经济的质控措施即可以阻止或至少会减少细胞错误鉴定的发生,这也被认为是生物制药领域出现相对较低细胞错误鉴定报道的有效手段。
  细胞系遭污染,也许很容易发生,但发生了对科学研究影响有多大?Nature社论文章称,这要取决于实验项目的类型。
  比如说,细胞系被用作生化药剂来源,混入其中的另外一种细胞则是无害的。但是,如果用这个细胞系来研究某一组织的特性则可能出现重大的失误。因此,细胞鉴别格外重要。
  没有一个单一的方法可提供所有的信息来鉴定一个细胞系。
  STR分型是这一时期的*佳代表。随着新信息的可用,STR分型标准将会不断地改进,不仅保证科研用细胞的正确性,还要作为生产用细胞的质控方法,用于过程监测。
  素尔生物——细胞系培养&STR鉴定服务双重服务
  素尔生物细胞引进于ATCC/中科院/协和医院,已筛选出数百种状态良好的细胞系,构建了自家细胞库。本着严谨负责的态度,对细胞库中几乎所有的人源细胞系、大鼠细胞系、小鼠细胞系进行了STR鉴定,为您的科研工作提供安全保障。
  不再担心细胞黑身份,明明白白做实验的方法,你get到了没?
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