在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，从细胞生长角度来说，针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好，甚至死亡的原因.一、培养细胞不贴壁可能原因：●胰蛋白酶消化过度●支原体污染●培养基pH值过碱（NaHCO3分解）●细胞老化●接种细胞起始浓度太低或太高解决方法：●缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度●分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。●使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2●启用新的保种细胞●调节*接种细胞浓度二、悬浮细胞成簇可能原因：●...

T淋巴细胞转化实验的基本原理T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化.淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一.T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化.淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之...

DNA萤光染色法·原理︰利用萤光染剂（bisbenzimide,Hoechst33258）侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine(A-T)rich区域，因为支原体之DNA中A-T含量占多数（55～80%），所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后，在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之萤光小点，即为支原体之DNA，证明有支原体之污染。·特点︰简单、经济与灵敏，广泛使用，可作为例行之侦测步骤。可以侦测不易培养之支原体，例如M.hy...

细胞名称：4T1小鼠乳腺癌细胞介绍：4T1是从410.4瘤株中未经诱变筛得的6-硫鸟嘌噙抗性细胞株。当注射到BALB/c小鼠中时，4T1自发产生高转移肿瘤，可转移到肺，肝，淋巴结和大脑，同时在注射部位形成始发灶。诱导转移时不需要摘除始发灶。4T1细胞在BALB/c小鼠中的生长与转移特性与人体中的乳腺癌十分相近。这种肿瘤是人VI期乳腺癌的动物模型。4T1-诱导的肿瘤在手术后及未手术情况下转移的动力学相近，可以用作手术后及未手术模型。跟其他肿瘤模型相比，由于4T1的抗6-硫鸟嘌噙...

细胞培养板的选择细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536孔等；根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。（1）平底和圆底（U型和V型）培养板的区别和选择不同形状的培养板有不同用途。培养细胞，通常是选用平底的，这样便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致。因此做MTT等实验时，无论是贴壁和悬浮细胞，一般选用平底板。测...

细胞培养常用培养基及基本特性1、RPMI-1640MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也称zui低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单，...

夏天到了，细胞更容易被污染，很多养细胞的朋友在这方面困惑颇多，今天针对贴壁生长的细胞谈谈。在讨论之前，大家首先要有一个概念，即洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；污染处理流程1、将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10m...

影响细胞生长的几点因素，摘要：细胞在体外进行培养,失去了机体的调节和控制,因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境.外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长.一、温度：一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃.温度过高或过低都会影响到细胞的生长.细胞耐受低温的能力比抗热的能力强,在低温下,细胞的代谢活力及核分裂降低.温度低于0℃时,虽影响细胞代谢,但并无伤害作用.把细胞置于23~25℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减缓,不过...