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  • 2020

    6-15

    标准菌株是属于种属鉴定的规范参照菌,而质控菌株,往往是从功能或用途上讲的,通常是以标准菌株用来做质控的。标准菌株使用注意事项:1、选择合适的培养基:勿使用选择性培养基。一般使用非选择性的增菌培养基,因为微生物在选择性培养基中生长某些生物特性可能丢失,保藏的菌种的生物特性可能与标准菌株特性不同。2、菌液的浓度:菌液的浓度一般越大,菌种保存时间越长。保藏时细菌常使用菌液,霉菌常用无菌水或生理盐水制备成的孢子悬液。3、甘油浓度:甘油终浓度一般为10%~20%。由于甘油原液太粘稠,需...

  • 2020

    6-15

    菌种是从事微生物学及生命科学研究的基本材料,在医学领域中,诊断制品的制备,菌苗的生产、微生物致病性研究。1、梭氏法将容有1滴细胞悬液的小管﹐置于盛有氢氧化钾或五氧化二磷吸水剂的大试管中﹐用真空泵抽至1、3帕时﹐将大试管密封保存。这是为减少细胞死亡率而采取的一种不经冻结﹑缓慢脱水的干燥保藏法﹐适用于多种细菌﹑真菌。2、冷冻真空干燥法将细胞悬液每0、1~0、2毫升注入一无菌安瓿瓶﹐于-40℃预冻1小时﹐再于-20~30℃﹑真空度为13、3帕的条件下脱水。在脱水过程后期﹐安瓿瓶外温...

  • 2020

    4-20

    所有体外培养细胞,包括初代培养及各种细胞系,当生长达到一定密度后,都需做传代处理。传代的频率或间隔与培养液的性质、接种细胞数量和细胞增殖速度等有关。接种细胞数量大、细胞基数大、相同增殖速度条件下,细胞数量增加与饱和速度相对要快(实际上细胞接种数量大时细胞增殖速度比稀少时要快)。连续细胞系和肿瘤细胞系比初代培养细胞增殖快,培养液中血清含量多时细胞增殖比少时快。以上情况都会缩短传代时间。所谓细胞“一代”一词,系仅指从细胞接种到分离再培养时的一段时间,这已成...

  • 2020

    4-11

    细胞株和细胞系的区别,列表说明我来答这么龙厄尔尼诺LV.12019-02-24聊聊细胞株和细胞系的区别:一、概念不同1、细胞株:细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(CellStrain)。2、细胞系:细胞系(cellline)指原代细胞培养物经*传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。二、形成方法不同1、细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物成为细胞株。...

  • 2020

    4-7

    细胞在体外进行培养时影响生长的几点因素细胞在体外进行培养,失去了机体的调节和控制,因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境.外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长.一、温度:一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃.温度过高或过低都会影响到细胞的生长.细胞耐受低温的能力比抗热的能力强,在低温下,细胞的代谢活力及核分裂降低.温度低于0℃时,虽影响细胞代谢,但并无伤害作用.把细胞置于23~25℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减...

  • 2020

    3-19

    什么时候需要稳定细胞株?以下实验,构建稳定细胞株而不是瞬时转染更能满足实验要求:1)外源片段在分裂细胞中长期(2周)稳定表达。虽然普通转染实验一般只能保证2-4天的转染和表达效率,但腺病毒载体在多数分裂细胞中可以维持2-4周内的高转染效率和表达周期。而非分裂细胞,可以使用腺相关病毒载体转导外源基因,因为腺相关病毒载体在许多非分裂细胞中可以保持长达1年的高效表达。2)需要构建使用诱导表达系统,这主要是由于:a)过表达基因或者干扰目的基因引起细胞毒性或者抑制细胞生长等不利因素;b...

  • 2020

    3-18

    细胞培养注意事项(入门级)总的原则:无菌操作、保证细胞培养环境的稳定性按时间顺序整理1、细胞房和生物安全柜(或超净工作台)先开紫外照射30min。作用:对环境灭菌(空气)。(备注:如果着急,至少也要开15分钟)在做实验之前考虑好需要哪些物品。开始照射之前,将所需要用到的物品都放到生物安全柜(或超净工作台)里面。常用移液枪或电动移液器等,需要在工作台上放置一套设备。细胞培养箱一般都已经调整好。定期留意一下二氧化碳是否足够。不够及时更换。2、显微镜需要定期消毒酒精擦拭。注意:显微...

  • 2020

    3-9

    细胞养不好?那可能是这些没注意到位1、购买的细胞死亡或存活率不佳可能原因?细胞冷冻管解冻后,为何会有细胞数目太少的情形?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浮细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于–80℃太久。研究人员在冷冻细胞培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解...

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