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  • 2020

    6-30

    建议在无菌条件下采用下列方法进行恢复培养。方法一:1、用浸过75%酒精的脱脂棉团擦净安瓿表面。2、待安瓿表面酒精挥发后,将安瓿的封口端移至酒精灯火焰上加热。3、用无菌水滴至加热的安瓿顶端使玻璃破裂。4、用无菌镊子敲开安瓿顶端。5、用无菌吸管加入0、3~0、5ml的液体培养基于安瓿管内,使冻干菌种溶解呈悬浮液。6、混匀后,将悬浮液移植于液体培养基中或固体琼脂上,在适宜温度等条件下培养。方法二:1、用三棱钢锉在封口下约2cm处横锉安瓿。2、用浸过75%酒精的脱脂棉团擦净安瓿表面。...

  • 2020

    6-28

    1冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。2细胞冷冻管解冻培养时,是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞),在解冻之后,应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中,待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可,如此可避免大部分解冻后细胞无法生...

  • 2020

    6-15

    标准菌株是属于种属鉴定的规范参照菌,而质控菌株,往往是从功能或用途上讲的,通常是以标准菌株用来做质控的。标准菌株使用注意事项:1、选择合适的培养基:勿使用选择性培养基。一般使用非选择性的增菌培养基,因为微生物在选择性培养基中生长某些生物特性可能丢失,保藏的菌种的生物特性可能与标准菌株特性不同。2、菌液的浓度:菌液的浓度一般越大,菌种保存时间越长。保藏时细菌常使用菌液,霉菌常用无菌水或生理盐水制备成的孢子悬液。3、甘油浓度:甘油终浓度一般为10%~20%。由于甘油原液太粘稠,需...

  • 2020

    6-15

    菌种是从事微生物学及生命科学研究的基本材料,在医学领域中,诊断制品的制备,菌苗的生产、微生物致病性研究。1、梭氏法将容有1滴细胞悬液的小管﹐置于盛有氢氧化钾或五氧化二磷吸水剂的大试管中﹐用真空泵抽至1、3帕时﹐将大试管密封保存。这是为减少细胞死亡率而采取的一种不经冻结﹑缓慢脱水的干燥保藏法﹐适用于多种细菌﹑真菌。2、冷冻真空干燥法将细胞悬液每0、1~0、2毫升注入一无菌安瓿瓶﹐于-40℃预冻1小时﹐再于-20~30℃﹑真空度为13、3帕的条件下脱水。在脱水过程后期﹐安瓿瓶外温...

  • 2020

    4-20

    所有体外培养细胞,包括初代培养及各种细胞系,当生长达到一定密度后,都需做传代处理。传代的频率或间隔与培养液的性质、接种细胞数量和细胞增殖速度等有关。接种细胞数量大、细胞基数大、相同增殖速度条件下,细胞数量增加与饱和速度相对要快(实际上细胞接种数量大时细胞增殖速度比稀少时要快)。连续细胞系和肿瘤细胞系比初代培养细胞增殖快,培养液中血清含量多时细胞增殖比少时快。以上情况都会缩短传代时间。所谓细胞“一代”一词,系仅指从细胞接种到分离再培养时的一段时间,这已成...

  • 2020

    4-11

    细胞株和细胞系的区别,列表说明我来答这么龙厄尔尼诺LV.12019-02-24聊聊细胞株和细胞系的区别:一、概念不同1、细胞株:细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(CellStrain)。2、细胞系:细胞系(cellline)指原代细胞培养物经*传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。二、形成方法不同1、细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物成为细胞株。...

  • 2020

    4-7

    细胞在体外进行培养时影响生长的几点因素细胞在体外进行培养,失去了机体的调节和控制,因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境.外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长.一、温度:一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃.温度过高或过低都会影响到细胞的生长.细胞耐受低温的能力比抗热的能力强,在低温下,细胞的代谢活力及核分裂降低.温度低于0℃时,虽影响细胞代谢,但并无伤害作用.把细胞置于23~25℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减...

  • 2020

    3-19

    什么时候需要稳定细胞株?以下实验,构建稳定细胞株而不是瞬时转染更能满足实验要求:1)外源片段在分裂细胞中长期(2周)稳定表达。虽然普通转染实验一般只能保证2-4天的转染和表达效率,但腺病毒载体在多数分裂细胞中可以维持2-4周内的高转染效率和表达周期。而非分裂细胞,可以使用腺相关病毒载体转导外源基因,因为腺相关病毒载体在许多非分裂细胞中可以保持长达1年的高效表达。2)需要构建使用诱导表达系统,这主要是由于:a)过表达基因或者干扰目的基因引起细胞毒性或者抑制细胞生长等不利因素;b...

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