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  • 2020

    4-7

    细胞在体外进行培养时影响生长的几点因素细胞在体外进行培养,失去了机体的调节和控制,因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境.外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长.一、温度:一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃.温度过高或过低都会影响到细胞的生长.细胞耐受低温的能力比抗热的能力强,在低温下,细胞的代谢活力及核分裂降低.温度低于0℃时,虽影响细胞代谢,但并无伤害作用.把细胞置于23~25℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减...

  • 2020

    3-19

    什么时候需要稳定细胞株?以下实验,构建稳定细胞株而不是瞬时转染更能满足实验要求:1)外源片段在分裂细胞中长期(2周)稳定表达。虽然普通转染实验一般只能保证2-4天的转染和表达效率,但腺病毒载体在多数分裂细胞中可以维持2-4周内的高转染效率和表达周期。而非分裂细胞,可以使用腺相关病毒载体转导外源基因,因为腺相关病毒载体在许多非分裂细胞中可以保持长达1年的高效表达。2)需要构建使用诱导表达系统,这主要是由于:a)过表达基因或者干扰目的基因引起细胞毒性或者抑制细胞生长等不利因素;b...

  • 2020

    3-18

    细胞培养注意事项(入门级)总的原则:无菌操作、保证细胞培养环境的稳定性按时间顺序整理1、细胞房和生物安全柜(或超净工作台)先开紫外照射30min。作用:对环境灭菌(空气)。(备注:如果着急,至少也要开15分钟)在做实验之前考虑好需要哪些物品。开始照射之前,将所需要用到的物品都放到生物安全柜(或超净工作台)里面。常用移液枪或电动移液器等,需要在工作台上放置一套设备。细胞培养箱一般都已经调整好。定期留意一下二氧化碳是否足够。不够及时更换。2、显微镜需要定期消毒酒精擦拭。注意:显微...

  • 2020

    3-9

    细胞养不好?那可能是这些没注意到位1、购买的细胞死亡或存活率不佳可能原因?细胞冷冻管解冻后,为何会有细胞数目太少的情形?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浮细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于–80℃太久。研究人员在冷冻细胞培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解...

  • 2020

    2-25

    细胞株在生物制药中使用非常广泛,细胞株培养条件简单,贴壁强度适中,比较容易转染,很适合用它来研究一般哺乳动物基因的功能。细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。细胞株的筛选我们要注意加药时间以及维持浓度:1.由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以细胞株筛选时不能太早;但是也不能太晚,因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大,增值较慢,时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没,终...

  • 2020

    2-14

    质控菌株本质上是标准菌株的商业衍生产品,其应有可靠的溯源证明追溯至其使用的标准菌株来源,在微生物实验室仅可作为工作菌株进行使用,在使用前也应进行特性和纯度的确认。质控菌种基本上分为两类:第一种满足低浓度接种量的要求,细菌含量一般小于100cfu,这是各种微生物培养基促生长试验、微生物阳性对照试验的接种量要求,无菌工艺模拟试验中培养基的灵敏度检测、无菌或微生物限度检查实验方法验证等。为了满足高浓度接种的需要,其他种类的细菌含量一般为105-106cfu。是对防腐剂、抑菌剂、消毒...

  • 2020

    1-16

    结肠癌细胞株延伸出早期结肠癌治疗方法结肠癌起病隐匿,早期的症状不是很明显,主要有大便习惯改变、便次增多或无原因的粘液、脓血便、原因不明的低烧、盗汗、贫血等。出现结肠癌症状时要及时去医院进行详细的检查。1965年科研人员将人结肠癌与胰腺癌组织中提取到r细胞膜糖蛋白,并发现也存在于内胚层衍生的消化道腺癌及2-6个月胚胎肝、肠及胰腺组织中,故而命名为CEA,且认为属于可特异地测定结肠癌,亦被后继的工作证实。随着肿瘤分子遗传学的研究,体外基因扩增技术聚合酶链式反应(PCR)的发展与应...

  • 2020

    1-8

    关于ATCC的细胞,你需要知道的那些事儿ATCC以生命科学领域*知识的获取,分类,汇总,完善进而广泛传播为己任,以期为推动生物原料,生物信息,生物技术,知识产权,规范等相关领域的前沿性、合法化、实用性发挥一定的作用。ATCC拥有目前zui大的、品种zui丰富的微生物、细胞系以及重组DNA原料,同时它也是科研工作者公认的提供可靠的研究材料的供应商。ATCC的成立可追溯到1925年,一个科学委员会认识到科学研究对于微生物的大量需求而萌发了创建一个微生物相关制品供应中心的想法。而今...

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