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ATCC细胞株应用广泛

浏览次数:940发布日期:2016-01-26
    ATCC细胞株宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
  ATCC细胞株的配制
  (1)称量和熬煮
  按细胞株配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。
  (2)加热溶解
  把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
  (3)分装
  按实训要求,将配制的细胞株分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使细胞株沾在管口或瓶口上造成污染。
  分装量:ATCC细胞株约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体细胞株以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
  (4)加棉塞
  细胞株分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入细胞株内造成污染,并保证有良好的通气性能。
  (5)包扎
  加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明细胞株名称、组别、配制日期。
  ATCC细胞株配制注意事项
  1.细胞株经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。
  2.ATCC细胞株一般不需要调pH。对于要调节pH的细胞株,一般用pH试纸测定其pH。如果细胞株偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏细胞株成分。
  3.细胞株在使用时也可以做成不含琼脂的液体细胞株,用于菌类的震荡培养。
  4.ATCC细胞株也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.2g/L细胞株,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性。
 
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